(基因工程)生物,基因工程的最后一步检测和表达
检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因(目的基因)是否成功的导入受体细胞。或者用RNA分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。
获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定。在导人目的基因前,首先要获得目的基因即本题中的编码毒素蛋白的DNA序列,然后要将目的基因与运载体结合即与细菌质粒重组。
应该是用标记基因。因为标记基因可产生相应的性状(相应抗体),利用抗原-抗体杂交可表明目的基因是否已形成蛋白质产品进而筛选。DNA分子杂交技术是检验目的基因是否插入染色体DNA中(插入不一定表达)。
什么是报告基因检测法?
1、报告基因(reporter:gene)是指其编码产物能够被快速地测定的一类特殊用途的基因,常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官,并可以方便快速检测其表达活性。可见报告基因实质是起到了判断目的基因是否已经成功地导入到受体细胞并且表达的标记基因的作用。
2、报告基因 (reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。
3、什么是标记基因和报告基因 标记基因通常用来检验重组DNA载体转化成功与否,或者检测目的基因在植物细胞或组织中的定位。常用的标记基因是一些抗生素抗性基因,如卡那霉素抗性基因、潮霉素标记基因等。
4、详细解释:报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
5、报告基因检测是科研中的一项关键技术,用于测量转录调控元件的活性。它通过检测如转录因子或基因启动子中的元素,揭示它们在细胞内的作用。
常规转录组测序和数字基因表达谱测序(RNA-seq)有什么不同?初接触,很多...
1、基本目的是类似的。不同之处在于测序的模板序列,前者是直接随机测序cDNA库,后者是先把模板按照一定方法打断(例如酶切或其他),只从打断位置开始测序,测序片段短,但相应深度更高。如果你已经有参考基因组,使用所谓“表达谱”测序是可以的。
2、第一,测序目标不同。转录组测序可以测定特定组织中全部mRNA,而表达谱测序只是测定mRNA的酶切标签序列(21 bp)。第二,代表性不同。数字表达谱测序只测定21bp序列,而转录组测序测定转录本全长,因而可以更准确地代表样品转录表达情况。第三,应用范围不同。
3、转录组测序和表达谱测序的区别:转录组测序是RNA水平测序,相当于DNA水平的基因组测序,是一个框架;表达谱主要研究的是基因表达量的变化,上调或下降。先要有转录组或是基因组才可以做表达谱,否则没有Ref做参考。
4、而表达谱测序只适用于基因组序列已知的物种转录组测序和数字表达谱测序相比,不能反映基因转录表达的特点和规律,测序目标不同;第三,主要有如下不同。数字表达谱测序只测定21bp序列,因而可以更准确地代表样品转录表达情况。
有关基因工程中目的基因的检测的问题。
1、检测分三种,首先是通过对标记基因的检测,通常用DNA分子杂交技术,来检验标记基因(目的基因)是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术,来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。最后可以用抗原-抗体检验,来验证导入基因是否成功表达。用标记基因检测与鉴定 只是一个简写。
2、第一个问题:生物工程中检测的目的是为了确认目的基因确实是按照设计好的方案插入了。
3、从转基因生物种取出含有目的基因片段的双链DNA,然后加热使之变性成两条单链。再用DNA探针与这两条单链分别杂交(即复性,产生双链)。所谓的探针就是含有目的基因的同位素标记过的DNA片段。当目的基因成功导入我们要测的基因上时,探针就可以与之进行碱基配对。